使用制備液相色譜儀的時候遇到故障不要怕，趕緊收藏本文

　　一、開機

　　1、接通電腦和儀器電源(接通電源之前可先把吸頭拿到要使用的流動相瓶中)；

　　2、開儀器電源開關，一般先上后下，下為檢測器開關；

　　3、檢查流動相是否夠，儀器上記錄的溶劑量時候正確；

　　4、開電腦；

　　5、打開儀器聯機軟件進入界面，點擊啟動設置泵流速為10，此時儀器中應該有液體流出；

　　6、點擊平衡然后點擊每個波長和調整；

　　沖一段時間，待壓力穩定后可以進樣。

　　二、進樣

　　1、將進樣器扭到load朝上，吸取一定量待分離液，快速注入，做過的是吸取0.2毫升；

　　2、點擊控制界面菜單欄中“運行控制”按鈕—樣品信息—設置信息存儲路徑(每次都要做)；

　　3、扭動進樣器，使處于inload狀態，保留時間開始計時；

　　4、接峰；

　　5、所有峰出來后，點擊菜單欄中的中斷—中斷，準備重復進樣。

　　三、關機

　　1、點擊中斷后沖幾分鐘，將流速設為0，待壓力為0后將吸頭轉移到甲醇中，并把流速設為10；

　　2、沖到已經沒有東西被沖下為止，一般需要半個小時。一般此時壓力早已穩定；

　　3、將流速設為0，點擊界面上的關閉(在啟動旁邊)；

　　4、關閉窗口，彈出的窗口都點肯定的，如確定是等。

　　制備液相色譜儀常見的故障

　　1、氣泡溢出

　　流動相內有氣泡，關閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進入液相色譜流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內，過濾器內部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開purge鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，說明過濾器內部的霉菌菌團已被硝酸破壞，流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調至1.0～3.0ml/min，純水沖洗過濾器1小時左右。即可將過濾器清洗干凈。關閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時即可。

　　2、峰面積重復性不佳

　　(1)進樣閥漏液。

　　(2)加樣針不到位。

　　(3)液量不足。處理對于*種情況更換進樣閥墊圈；對于第二種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩地從LOAD狀態轉換到INJECT狀態，以保證進樣量的準確。日常工作中，液相色譜儀的保養非常重要，如要注意不要讓空氣進入輸液系統和高壓泵中，儲液器內的溶液如長時間未用應清洗儲液器并更換溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機鹽析出或沉積；樣品的前處理也很重要，任何樣品都要盡可能地去除雜質，*溶解，盡量減少對色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時避免注射過濃的樣品溶液，以免殘留液在進樣閥內析出固體引起堵塞；色譜柱作好標記，用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。

　　3、柱壓高原因

　　(1)緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內。

　　(2)樣品污染沉積。處理對于*種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應提高流速沖洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定)，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。

　　4、既無壓力指示，又無液體流過

　　(1)泵密封墊圈磨損。

　　(2)大量氣泡進入泵體。處理對于*種情況，更換密封墊圈；對于第二種情況，在泵作用的同時，用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。

　　5、壓力波動大，流量不穩定

　　原因系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸入空氣，流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

　　6、出峰不佳，峰分叉

　　(1)色譜柱被污染。

　　(2)柱頭填料塌陷。處理對于*種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定)，再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對于第二種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結或塌陷。去除硬結部分(污染的填料)，裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。

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